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深挖友康NK无血清培养基——细胞功能检测第一弹

作者:友康恒业生物科技(北京)有限公司 2022-05-12T09:33 (访问量:6316)

继复星凯特、药明巨诺的CAR-T产品成功上市,南京传奇的的CAR-T产品成功出海后,免疫类细胞疗法掀起了一股浪潮。然而CAR-T产品的竞争越发激烈,其本身也伴随着大量局限性,相比之下NK细胞治疗成为了免疫疗法的新风向。

NK细胞培养难度远大于T细胞,受限于血液来源中的NK比例较低且不稳定,NK本身的分裂数量有限等因素,获得高纯度高数量的NK细胞困扰着科研人员们。友康生物全新升级的NK细胞纯因子培养套装4.0,可用于从血液样本中分离到的单个核细胞的激活,以及后续向NK细胞的诱导及扩增培养,产品性能如下:

微信截图_20220317145419.png

注:以上表格为客观性能,并不是最佳性能

然而,讨论产品性能的同时我们不应忘记NK细胞本身的作用——肿瘤杀伤能力。经友康体系培养的NK细胞是否具备正常的肿瘤杀伤效果,我们将用三期栏目验证。

实验验证:

NK细胞对K562的杀伤

检测方法:

培养14天左右的NK细胞与CFSE染色的K562共孵育4h,后检测K562凋亡率:

1. K562用0.5uM的CFSE染色,37℃孵育10min,完全培养基清洗两次。

2. 5×104个CFSE染色的K562加入96孔板,以0.5:1, 1:1, and 2:1的效靶比混入NK细胞。

3. 置于37℃、5%CO2培养箱中孵育4h。

4. 将96孔板中的细胞全部吸出,使用流式细胞仪计数。

K562的杀伤率=(接种K562细胞数-孵育4h后剩余的K562细胞)/ 接种K562细胞数

检测结果:

表格2.png

共孵育4h后,镜下观察可见K562细胞形态发生明显变化:

样本716.jpg


检测结论:

经友康体系培养的NK细胞具备正常且有效的对K562细胞杀伤效果。

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