Tubastatin A Hydrochloride

MCE 国际站：Tubastatin A Hydrochloride

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-13271

CAS：1310693-92-5

Synonyms：Tubastatin A HCl; TSA HCl

纯度：98.19%

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：Tubastatin A Hydrochloride (Tubastatin A HCl) 是一种有效的，选择性的 HDAC6 抑制剂，IC50 值为 15 nM，对其选择性是 HDAC8 外的其他亚型的 1000 多倍。Tubastatin A Hydrochloride 还抑制 HDAC10 和 MBLAC2。

体外：Tubastatin A 对所有 11 种 HDAC 亚型均有显著选择性，对除 HDAC8 以外的所有亚型的选择性均超过 1000 倍，而对 HDAC8 的选择性约为 57 倍。在同型半胱氨酸 (HCA) 诱导的神经变性试验中，Tubastatin A 从 5 μM 开始表现出剂量依赖性保护作用，可防止 HCA 诱导的神经细胞死亡，在 10 μM 时几乎完全保护[1]。100 ng/mL Tubastatin A 可增强 Foxp3+ T 调节细胞 (Tregs) 对体外 T 细胞增殖的抑制[2]。在 CC12 细胞中使用 Tubastatin A 处理会导致肌管形成障碍，因为在肌管中 α-微管蛋白过度乙酰化会导致肌管伸长[3]。最近的一项研究表明，Tubastatin A 治疗可增加细胞弹性，原子力显微镜 (AFM) 测试显示，小鼠卵巢癌细胞系 MOSE-E 和 MOSE-L 中的肌动蛋白微丝或微管网络不会发生剧烈变化[4]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

体内：每日 0.5 mg/kg 剂量的 Tubastatin A 可抑制 HDAC6，从而促进小鼠炎症和自身免疫模型中的 Tregs 抑制活性，包括多种形式的实验性结肠炎和完全主要组织相容性复合体 (MHC) 不相容的心脏移植排斥反应[2]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

动物实验：使用每组 10 只小鼠评估 HDAC6 靶向作用在葡聚糖硫酸钠 (DSS) 和结肠炎过继转移模型中的效果。每天将新鲜制备的 4% (wt/vol) DSS 添加到 WT B6 小鼠的 pH 平衡自来水中，连续 5 天。小鼠每天用 tubacin 或 niltubacin（0.5 mg/kg 体重/天，腹腔注射）治疗 7 天，并通过每日监测体重、粪便稠度和粪便血液来评估结肠炎。粪便稠度评分为 0（硬）、2（软）或 4（腹泻），粪便血液（潜血）评分为 0（无）、2（潜血）或 4（肉眼可见）。为了评估在 T 细胞依赖性模型中预防结肠炎的效果，将使用磁珠从 WT 小鼠中分离的 CD4+ CD45RBhi T 细胞（1×106）（> 95% 细胞纯度，流式细胞术）通过腹腔注射到 B6/Rag1−/− 小鼠体内，再加上使用磁珠从 HDAC6−/− 或 WT 小鼠中分离的 CD4+ CD25+ Tregs（1.25×105）（> 90% Treg 纯度，流式细胞术），每两周监测一次小鼠是否有结肠炎的临床证据。为了评估对已确诊的 T 细胞依赖性结肠炎的治疗效果，将 CD4+ CD45RBhi 细胞（1×106）通过腹腔注射到 B6/Rag1−/− 小鼠体内。一旦出现结肠炎，小鼠还会接受如上所述从 HDAC6−/− 或 WT 小鼠中分离的 CD4+ CD25+ Tregs（5×105 细胞）或用 HDAC6i（tubastatin A）或 HSP90i（17-AAG）治疗。监测小鼠的持续体重减轻和粪便稠度。研究结束时，对用 Alcian Blue 或苏木精和伊红染色的结肠石蜡切片进行组织学分级或通过免疫过氧化物酶染色评估 Foxp3+ Treg 浸润。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：原代皮质神经元培养物取自 Sprague-Dawley 胎儿大鼠（胚胎第 17 天）的大脑皮层。所有实验均在接种后 24 小时开始。在这些条件下，细胞不易受到谷氨酸介导的兴奋毒性的影响。对于细胞毒性研究，用温热的 PBS 冲洗细胞，然后将其置于含有 5.5 g/L 葡萄糖、10% 胎牛血清、2 mM L-谷氨酰胺和 100 μM 胱氨酸的最低必需培养基中。通过向培养基中添加谷氨酸类似物同型半胱氨酸 (HCA；5 mM) 来诱导氧化应激。HCA 由 100 倍浓缩溶液稀释，并调节至 pH 7.5。与 HCA 结合，用指定浓度的 Tubastatin A 处理神经元。 24 小时后通过 MTT 测定法（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）评估活力。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：酶抑制试验使用 Reaction Biology HDAC Spectrum 平台进行。HDAC1、2、4、5、6、7、8、9、10 和 11 试验使用分离的重组人蛋白；HDAC3 试验使用 HDAC3/NcoR2 复合物。HDAC1、2、3、6、10 和 11 试验的底物是来自 p53 残基 379-382 (RHKKAc) 的荧光肽；HDAC8 的底物是基于 p53 残基 379-382 (RHKAcKAc) 的荧光二酰基肽。乙酰-赖氨酸 (三氟乙酰基)-AMC 底物用于 HDAC4、5、7 和 9 试验。将 Tubastatin A 溶解于 DMSO 中，以 10 剂量 IC50 模式进行测试，从 30 μM 开始进行 3 倍连续稀释。对照化合物 Trichostatin A (TSA) 以 10 剂量 IC50 模式进行测试，从 5 μM 开始进行 3 倍连续稀释。通过曲线拟合剂量/反应斜率提取 IC50 值。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

参考文献：

[1]. Kyle V. Butler et al. Rational Design and Simple Chemistry Yield a Superior, Neuroprotective HDAC6 Inhibitor, Tubastatin A J. Am. Chem. Soc., 2010, 132 (31), pp 10842-10846 [2]. de Zoeten EF, et al. Histone deacetylase 6 and heat shock protein 90 control the functions of Foxp3(+) T-regulatory cells. Mol Cell Biol. 2011 May;31(10):2066-78. [3]. Di Fulvio S, et al. Dysferlin interacts with histone deacetylase 6 and increases alpha-tubulin acetylation. PLoS One. 2011;6(12):e28563 [4]. Ketene AN, et al. Actin filaments play a primary role for structural integrity and viscoelastic response in cells. Integr Biol (Camb). 2012 May;4(5):540-9. [5]. Brijmohan AS, et al. HDAC6 Inhibition Promotes Transcription Factor EB Activation and Is Protective in Experimental Kidney Disease. Front Pharmacol. 2018 Feb 1;9:34. [6]. Severin Lechner, et al. Target deconvolution of HDAC pharmacopoeia reveals MBLAC2 as common off-target. Nat Chem Biol. 2022 Apr 28.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；
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