测定饲料中添加剂维生素A的高效液相色谱法(HPLC)-分析方法-资讯-生物在线

测定饲料中添加剂维生素A的高效液相色谱法(HPLC)

作者:杭州尔首科学仪器有限公司 2013-04-22T00:00 (访问量:5422)

       维生素A是复杂机体必需的一种营养素,维持正常的视觉反应。 维持上皮组织的正常形态与功。 维持正常的骨骼发育。它以不同方式几乎影响机体的一切组织细胞。尽管是一种最早发现的维生素,但有关它的生理功能至今尚末完全揭开。就目前的知识而言,维生素A(包括胡萝卜素)最主要是生理功能包括:①.维持视觉 ②.促进生长发育  ③.维持上皮结构的完整与健全 ④.加强免疫能力 ⑤.清除自由基。

测定饲料中添加剂维生素A
的步骤如下:

1.  试剂和溶液
1.1 标准溶液的制备
(1)维生素A乙酸酯标准品:维生素A乙酸酯含量≥99.0%
(2)维生素A乙酸酯标准贮备液:称取维生素A乙酸酯标准品34.4mg(精确至0.00001g)于棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,混匀,4℃保存,该贮备液浓度为344ug/ml(1000IU/ml)。
(3) 维生素A乙酸酯标准工作液:准确吸取维生素A乙酸酯标准贮备液1.0ml于100ml棕色容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,配置工作液浓度为3.44ug/ml(10IU/ml)。
1.2试样溶液制备
称取试样1g,精确至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入约80ml的甲醇,瓶塞不要拧紧,于60℃超声波水浴中超声提取30min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。如果试样中维生素A乙酸酯的标示量低于107IU/kg,则将溶液用0.45um的滤膜过滤,进样测定,否则需将溶液用甲醇进一步稀释,使维生素A乙酸酯的进样浓度与维生素A乙酸酯标准工作液接近。

2.色谱条件

  (1)色谱柱:VERTEX  C18柱4.6*150mm*5um  (2)流动相:甲醇:水=98:2
  (3)流速:1.2ml/min
  (4)检测波长:326nm
  (5)进样量:20ul
  (6)温度:室温

3.仪器

   水浴超声波,高效液相色谱仪LC-10Tvp紫外检测器SPD-10Tvp

4.谱图





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