类器官生成(培养)常用的小分子化合物(抑制剂&激活剂)
类器官是如何产生的
在适当的物理和生化线索条件下,原代组织或多能干细胞(诱导的多能干细胞(iPSC)或胚胎干细胞(ESC))可以产生类器官。
物理线索:为细胞附着和存活提供支持,包含胶原蛋白、纤连蛋白、巢蛋白和层粘连蛋白等。
生化线索:调节信号通路,从而影响增殖、分化和自我更新,包括视黄酸、GSK3β抑制剂(AR-A014418、GNF4877、AZD1080),TGFβ抑制剂(A 83-01、RepSox、SB525334)、HDAC抑制剂(SAHA、Trichostatin A、Valproic acid)、ROCK抑制剂(Y-27632、Y-27632 dihydrochloride、Fasudil法舒地尔、Hydroxyfasudil羟基法舒地尔、Y-33075、Chroman 1、GSK429286A、Thiazovivin)、EGF、FGF10、HGF、R-spondin、WNT3A、头蛋白、激活素A、p38抑制剂(SB202190、PD 169316)和胃泌素。
类器官和球状体的对比
类器官和类球体都是3D培养细胞。球状体通常由癌细胞系或肿瘤活检组织形成,为超低附着平板中的自由漂浮细胞聚集体,而类器官则来自嵌入在ECM水凝胶基质(如基质胶)中的组织干细胞。与球装体相比,类器官高度复杂,更接近体内状态。
2D与3D细胞模型系统的对比
模型系统通过从分子至整个生物体水平概括身体过程与功能来促进生物学研究。人体由以高度专门化方式组织的细胞和非细胞材料组成。用一种体外模型系统很难模拟人类生物学的所有方面。与在2D平面上生长细胞相比,3D细胞培养模型更能准确地代表活体生物体中细胞所经历的自然环境。
现有细胞模型系统的局限性
现有模型系统 |
特点 |
动物模型 |
l 人类与动物生物学存在差异 l 在成像和高通量研究中的可用性有限 l 成本高昂 |
2D细胞单层 |
l 细胞失去表型 l 缺乏细胞-细胞及细胞-基质之间的相互作用 l 无法模拟体内条件下的细胞功能和信号通路 |
3D细胞聚集体 |
l 瞬间模拟细胞组织和相互作用 l 难以维持长期培养 l 缺乏自我更新和分化的能力 |
类器官 |
来源 |
培养条件 |
类器官中的细胞类型 |
参考文献 |
胃 |
hPSC多能干细胞 |
内胚层诱导:Rock抑制剂(Y-27632)Cat#53006ES,52604ES 球状体生成:视黄酸 类器官形成:视黄酸、EGF |
LGR5+ 细胞、粘液细胞、胃内分泌细胞 |
1 |
hAdSC脂肪干细胞 |
LGR5+ 细胞、小凹粘液细胞、腺体粘液细胞、主细胞和肠内分泌细胞 |
2 |
||
肠 |
hPSC |
类器官形成:FGF4、WNT3A 成熟:RSpondin1、头蛋白、EGF、FGF4、WNT |
肠细胞、杯状细胞、潘氏细胞和肠内分泌细胞 |
3 |
hAdSC |
建立:EGF、Rspondin、头蛋白、WNT3A、烟酰胺、胃泌素
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